DNA采血卡不同环境条件下血痕中微RNA稳定性研究

DNA采血卡不同环境条件下血痕中微RNA稳定性研究

DNA采血卡的提取研究背景在法医现场勘验工作中常遇到不同种类的体液斑迹,如血痕、精斑、唾液斑、汗渍等,其中血痕是犯罪现场中最常见的生物检材,也是法医物证检验工作中最重要的检测项目之一。血液一旦离开人体,便在载体上逐渐形成血痕(迹),且面临外界物理、化学以及生物学等多种因素的作用和影响,导致其污染、降解、腐败过程十分迅速。此外,随着血痕的老化,其内部成分不断发生改变,其中大分子蛋白质、DNA及RNA破坏会增加血痕检验的难度。故血痕的检验过程及难度也高于临床血液检验,且血痕的腐败严重影响其检测结果,如何准确、高效地对遗留于犯罪现场中的血痕进行识别,是法医检案工作中必须解决的关键问题。MiRNA作为一类单链内源性非编码小RNA分子(22个左右核苷酸),其表达具有高度的组织特异性和时序性,并且不易降解(强稳定性)等特征。这些优势为应用于法医工作中提供基础,使其在法医物证学检测方面(如体液、组织识别等)具有重要的意义和良好的应用前景,目前已有大量文献证实可作为血液特异性分子标志物。与此同时,miRNA虽具有较强的稳定性,但理论上而言,其仍会受到RNA酶的影响。既往临床研究通常将血液样本置于冰冻条件下保存来进行miRNA的稳定性研究,以找寻其最佳存储条件。近年来有研究者将血液、精液、唾液等制作成体液斑迹后,初步探讨其中miRNA的降解规律。而在法医现场勘验工作中遇到的生物检材多为微量物证,且常存在于室内或室外(自然条件),甚至遭到人为破坏(水洗或高温处理等);此外在法医物证工作方面,对生物检材的长期保存是其重要工作之一。目前多在实验室条件下(室温、低湿、避光)保存,而该存储条件对其中miRNA的稳定性的影响尚未可知。故探讨不同环境条件下血痕样本中miRNA的稳定性及时序性规律,判断miRNA应用于体液来源鉴定方面的潜力,进而确定血痕检材的最佳存储条件显得尤为重要。