贝斯特塑料培养皿使用介绍

一、聚苯乙烯细胞培养皿（塑料培养皿）是生命科学实验室中最基本的工具。因此体外的玻璃形式由Petri于1887年引入。除疏水性塑料的几何改性和亲水转化外，聚苯乙烯塑料培养皿在130年内基本保持不变。今天，聚苯乙烯培养皿在药理学和生物材料测试（细胞培养，动物模型，临床试验）的开始，它用于询问细胞，但也用于人类生命的开始，即体外受精。以前的实验工作挑战了聚苯乙烯培养皿的生物耐受性：Sommer等。表明当与水性介质接触时，聚苯乙烯变软，促进纳米级碱性层的形成的效果与包埋的ROS一起对细胞具有不利影响。

二、在干燥之前，应该没有来自缓动剂的内脏的食物。在干燥前一天执行这些步骤。

1.将~2 mL泉水倒入新的35 mm塑料培养皿中。

2.将缓释剂转移到含有泉水的新菜中，将其从食物中分离出来。通过在室温下将它们留在盘子中过夜来使心脏病死亡。

3.将含有~5 mL 10％甘油溶液（1份甘油，9份泉水）的玻璃表盘放入带盖的小塑料盒中。

4.将盒子在室温下放置过夜（约16小时）。

5.使用湿度计检查腔室内的湿度。约16小时后相对湿度应> 90％。准备琼脂涂层培养皿盖在使用当天准备琼脂涂层的盖子。不要存放或重复使用涂层盖子。

6.用瓶装泉水准备2％琼脂溶液，煮沸。

7.将 300μL沸腾琼脂溶液移液到35mm培养皿的盖子中。丢弃盘子本身; 只使用盖子。

8.快速工作，使用移液器的尖端将琼脂溶液均匀地分布在整个盖子周围。尽量减少过量的琼脂和不均匀的分布。

9.将盖子侧面倾斜，使多余的琼脂汇集到一侧。用移液管从盖子侧面取出并丢弃多余的琼脂。

10.让薄琼脂涂层固化并干燥5-10分钟。

11.使用微量移液管将步骤2中的饥饿的缓动剂转移到步骤10的琼脂涂覆的皿盖上。尽量减少随着缓步移植的水量。

12.使用微量移液管从盘盖上除去多余的水。

13.将含有缓动剂的琼脂涂层盖子放入步骤5的加湿室中，并孵育过夜（约16小时）。

14.从加湿室中取下盖子，用解剖显微镜检查干燥的样品。标本应该采用圆形的墩状外观。

15.将缓动剂保持在环境湿度（~40％相对湿度）下24小时，然后在室温下将其覆盖在干燥器中。

16.将 2 mL瓶装泉水移入培养皿盖。

当在解剖显微镜下观察时，已经干燥储存24小时的缓动剂在10分钟内开始退出其屯状态。通常在30-60分钟内观察到协调运动。生存率通常为~80％，并通过对协调运动和对刺激的反应（用微量移液管尖端接触）进行评分来判断。