FTA采血卡中制备样品的最佳做法

FTA采血卡中制备样品的最佳做法

血源性传染病的诊断主要依赖于检测血液样本中的致病因子。分子技术为此提供了敏感和特定的工具，尽管在现场环境中使用这些方法存在相当大的困难。在大规模流行病学研究中，FTA采血卡越来越受欢迎，可以快速收集和存档大量样品。然而，这些卡的下游处理存在一些困难，这对于准确诊断感染是必不可少的。在这里，我们描述了使用PCR从FTA采血卡进行样本处理的最佳实践方法的建议，用于锥虫病的分子诊断。

对五种技术进行了比较。直接施用全血的检测灵敏度（35.6％）低于全血，随后使用螯合树脂100（56.4％）从卡上洗脱。当在FTA卡上施用血液之前裂解时，获得了更好的表观敏感性（73.3％），尽管这并不重要。使用螯合树脂100（73.3％）进行后续洗脱后，这种情况没有改善，与野外血液直接DNA提取无显着差异（68.3％）。

基于这些结果，这些技术所需的努力程度以及现场条件下DNA提取的难度，我们建议将血液转移到FTA卡上，然后在螯合树脂100中作为最佳方法进行洗脱。

在普通滤纸上常规采集血液和血沉棕黄层样品，用于分析和检测不同的血液病原体。尽管在滤纸上收集大量采样的血液样本似乎比其他采样程序更方便，例如原位DNA提取，但滤纸不适合长期储存，因为它们不能保护样品免受破坏和退化。

（FTA）技术在这种基于纸张的系统上得到了改进。FTA采血卡设计用于直接从组织中固定和储存核酸，从而可以收集和存档核酸。FTA基质浸渍有蛋白质变性剂，其导致细胞和任何接触的生物体的裂解。此外，这些化学物质在干燥过程中会抑制碎屑，以确保卡片的安全处理而不存在生物危害的风险。FTA技术还包括螯合剂和自由基捕集阱，用于处理大气污染物，从而在室温下保护捕获的核酸至少10年以上。