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采血卡干血纸片法的采样、萃取流程
1)在收集卡中填写病人的姓名和采集日期等信息干血纸片法样本采集卡样式。由于戈谢病诊断需要检测酶活力,故常采用具有蛋白保存功能的滤纸片进行样本采集,如Whatman 903滤纸片;
2)采血取样。可使用毛细血管和静脉血(可以使用EDTA或ACD抗凝剂,但应避免使用肝素),注意不要使用含碘的消毒剂,在DBS卡的每个圈中滴一滴血,确保覆盖整个圈切完全渗透该滤纸(血滴仅滴在滤纸的一面,不要在同一滤纸圆圈中重复滴上血液)。
3)为了保留酶的活性,首先必须在室温下干燥4小时。干燥时保持滤纸悬空,水平固定在桌面边缘,以保证充分干燥,注意使卡片远离直接的热源或日光。为了避免交叉污染,一旦采集血样后,勿将卡片重叠放置。在血斑完全干燥后,使用塑封带将干燥收集卡进行封装,注意不要用手接触血斑,以防样本被污染。样本一般为室温保存及运输,如需长期储存,需深低温(-70度)保存 。
4)用打孔器在样品区截取一个小圆片,加入溶剂进行洗脱。在打孔器打孔过程中,要严格按照卡纸圆圈进行打孔,防止在打孔过程中样本间相互污染而影响检测结果。洗脱获得的样本可用于后续的仪器检测。
基于以上操作原理和方法,国内外已经开发了一批自动化的干血纸片法采样系统。通过自动化设备可实现多样本同时采集和萃取分析。